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免封閉PAGE凝膠超快速制備試劑盒15%
總貨號: MA0389
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本試劑盒適用于Tris-甘氨酸電泳體系,其中包括PAGE凝膠制備所需全套試劑,不需要壓線封閉,不需要加入TEMED,即可制備PAGE凝膠。所配制的濃縮膠帶有顏色,便于上樣。本試劑盒中過硫酸銨以溶液形式提供,可保證過硫酸銨溶液在4℃穩定保存三個月。

本試劑盒分離膠和濃縮膠緩沖液均含有SDS,只適用于變性凝膠電泳,如需要分析非變性蛋白,建議選購我公司 Native-PAGE非變性凝膠快速制備試劑盒(貨號:MA0172)。


產品優勢:

方便!不需壓線,一步灌膠,不需等待分離膠凝固

快速!最少2分鐘可灌注多塊凝膠,15min即可凝膠;

安全!徹底告別TEMED,避免接觸過硫酸銨粉末,遠離有毒試劑;

節約!一塊制膠成本低于3元錢,極大程度節約經費;

可靠!省去繁瑣計算稀釋操作,方法更可靠,電泳效果好,條帶更清晰;


數據展示: 

 


圖1.使用我公司PAGE凝膠超快速配制試劑盒10%配制丙烯酰胺凝膠后蛋白電泳考馬斯亮藍染色圖片。圖中左側第一泳道為我公司預染彩虹蛋白marker (10-190KD)(貨號MA0342),其余泳道是RIPA強裂解液提取的小鼠肝臟組織和A549細胞蛋白質。


 


圖2. 使用我公司免封閉PAGE凝膠超快速配制試劑盒10%濃度配制丙烯酰胺凝膠后蛋白免疫印記結果,實驗使用使用小鼠肝臟組織提取的蛋白,一抗是GAPDH單克隆抗體。


保存方法

本試劑盒保存于4℃,其中改良型過硫酸銨溶液長期儲存置于-20℃,1年有效。


操作步驟:

以一塊0.75/1.00/1.50mm厚的mini膠為例。

1. 參照凝膠模具說明書,裝配好凝膠模具。

2. 取等體積的分離膠溶液(2×)和分離膠緩沖液(2×),各2 / 2.7 / 4mL,混勻。

3. 取等體積的濃縮膠溶液(2×)和濃縮膠緩沖液(2×),各0.5 / 0.75 / 1mL,混勻。

4. 向步驟2已混合溶液中加入40 / 55 / 80ul的改良型過硫酸銨溶液,輕輕攪拌混勻,避免產生氣泡。將混勻后的溶液注入凝膠模具中,使液面距離短玻璃板上沿約1.5cm即可。

5. 向步驟3已混合溶液中加入10 / 15 / 20ul的改良型過硫酸銨溶液,輕輕攪拌使其混勻,不需要等待下層膠凝固,可直接將混勻后的溶液緩慢注入分離膠溶液上面,插入梳子。注意加入分離膠后要在2分鐘內將濃縮膠注入凝膠模具內,且在灌注濃縮膠時要緩慢,防止濃縮膠與分離膠混合在一起。

6. 靜置約15分鐘,等待濃縮膠凝固,小心地拔出梳子,用注射器或槍頭,吸取電泳緩沖液將加樣孔沖洗干凈,即可進行常規電泳操作。


注意事項

7. 蛋白條帶的清晰和平直與電泳條件相關,如果需要蛋白條帶更加清晰、平直,建議電泳時電壓在100-120V之間,如需要加快電泳速度,可增加至150V。

8. PAGE凝膠的凝聚速度與溫度和過硫酸銨的用量密切相關,可通過改變過硫酸銨的用量,控制PAGE凝膠的聚合速度,凝膠聚合過快不利于操作,應根據實際操作情況做適當的調整。

9. 本產品已加入TEMED替代品,如需進一步加速凝膠,可在配制時加入TEMED。

10. 本產品凝膠速度較快,不需將凝膠模具放置在37℃溫箱或者空調口下,正常室溫條件下配制即可。

11. 為了您的安全和健康,操作時請穿著實驗服并佩戴一次性手套。


附表1. SDS-PAGE分離膠的濃度與最佳分離范圍

SDS-PAGE分離膠濃度

最佳分離范圍

6% PAGE 凝膠

70-300kD

8% PAGE 凝膠

30-200kD

10% PAGE 凝膠

20-80kD

12.5% PAGE 凝膠

15-60kD

15% PAGE 凝膠

10-45kD


我司所售出產品僅供于科研研究用途(非臨床科研研究),每次銷售產品行為都適用于我司網上所列明的通用銷售條款

英文名字:One step PAGE Gel Fast Preparation Kit
質量標準:Meilunbio
請輸入貨號:
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摩爾濃度計算器 (本計算器可幫助您計算出特定溶液中溶質的質量、溶液濃度和體積之間的關系)
摩爾濃度計算公式:質量 (g) = 濃度 (mol/L) x 體積 (L) x 分子量 (g/mol)
質量(g
=
濃度 (mol/L)
x
體積 (L)
x
分子量 (g/mol)
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